探測靈敏度
發(fā)布時間:2016/2/20 15:04:15 訪問次數(shù):792
探測靈敏度是指生物芯片檢測儀器能夠?qū)⑿酒唿c從背景區(qū)分開,并且GRM21BR71H104KA01L探測到的斑點熒光的最小濃度值,單位一般用熒光分子數(shù)/每平方微米表示。目前國外最好的檢測儀能夠達到O.l個熒光分子/m2。
激光共聚焦掃描儀的探測器采用的是光電倍增管,其在可見光范圍內(nèi)是靈敏度最高的探測器,可探測到一個光子的存在,光電倍增管內(nèi)的功率放大器可將光信號轉(zhuǎn)化為電信號并放大100萬倍,通過改變光電倍增管的電壓可以很方便地改變光電倍增管的增益即靈敏度,目前國外最好的共聚焦掃描儀能夠達到0.1熒光分子/m2。CCD對微弱信號的放大功能不及PMT,在低亮度背景下,限制了微弱信號的檢測,CCD檢測儀的靈敏度能夠達到0.5熒光分子/岬12。
分辨率
生物芯片檢測儀的分辨率表示的是能夠分辨生物芯片斑點的最小細節(jié)的能力。生物芯片的微陣列點的直徑范圍通常在150~500 ym,對點進行精確的分析就要求檢測儀能夠?qū)⒚?/span>個陣列點分割成盡可能多的像素。有意義的像素越多,在進行熒光信號的定量分析時每個點的邊緣就可以分析的越準確,就越易與其他非特異的信號區(qū)分開。一般來說,微陣列的像素大小(或者說空間分辨率)不應大于最小徼陣列點直徑的1/8~1110,例如,20 ym…的分辨率可以檢測160 lim的點。
激光共聚焦掃描儀的分辨率是由針孔的大小和其掃描步距決定的,激光經(jīng)聚焦后產(chǎn)生極小的光斑,在光電倍增管前運用了探測針孔,因而具有較高的分辨率,可達幾微米。CCD檢測儀的分辨率由其CCD相機的像元尺寸和像素、成像視場、成像物鏡的縮小倍率等決定,目前性能最優(yōu)的CCD的靶面尺寸也只有16 mmx12 mm(像元尺寸10 Um),因此要達到整個芯片面積20 mm×50 mm,必須縮小成像才能完成,檢測儀的空間分辨率就只能達到30 ym左右,如果要提高分辨率,則只有采取圖像縫合技術,增加二維機械掃描臺,增加系統(tǒng)的復雜程度和成本。
探測靈敏度是指生物芯片檢測儀器能夠?qū)⑿酒唿c從背景區(qū)分開,并且GRM21BR71H104KA01L探測到的斑點熒光的最小濃度值,單位一般用熒光分子數(shù)/每平方微米表示。目前國外最好的檢測儀能夠達到O.l個熒光分子/m2。
激光共聚焦掃描儀的探測器采用的是光電倍增管,其在可見光范圍內(nèi)是靈敏度最高的探測器,可探測到一個光子的存在,光電倍增管內(nèi)的功率放大器可將光信號轉(zhuǎn)化為電信號并放大100萬倍,通過改變光電倍增管的電壓可以很方便地改變光電倍增管的增益即靈敏度,目前國外最好的共聚焦掃描儀能夠達到0.1熒光分子/m2。CCD對微弱信號的放大功能不及PMT,在低亮度背景下,限制了微弱信號的檢測,CCD檢測儀的靈敏度能夠達到0.5熒光分子/岬12。
分辨率
生物芯片檢測儀的分辨率表示的是能夠分辨生物芯片斑點的最小細節(jié)的能力。生物芯片的微陣列點的直徑范圍通常在150~500 ym,對點進行精確的分析就要求檢測儀能夠?qū)⒚?/span>個陣列點分割成盡可能多的像素。有意義的像素越多,在進行熒光信號的定量分析時每個點的邊緣就可以分析的越準確,就越易與其他非特異的信號區(qū)分開。一般來說,微陣列的像素大。ɑ蛘哒f空間分辨率)不應大于最小徼陣列點直徑的1/8~1110,例如,20 ym…的分辨率可以檢測160 lim的點。
激光共聚焦掃描儀的分辨率是由針孔的大小和其掃描步距決定的,激光經(jīng)聚焦后產(chǎn)生極小的光斑,在光電倍增管前運用了探測針孔,因而具有較高的分辨率,可達幾微米。CCD檢測儀的分辨率由其CCD相機的像元尺寸和像素、成像視場、成像物鏡的縮小倍率等決定,目前性能最優(yōu)的CCD的靶面尺寸也只有16 mmx12 mm(像元尺寸10 Um),因此要達到整個芯片面積20 mm×50 mm,必須縮小成像才能完成,檢測儀的空間分辨率就只能達到30 ym左右,如果要提高分辨率,則只有采取圖像縫合技術,增加二維機械掃描臺,增加系統(tǒng)的復雜程度和成本。
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